Tiocianato de guanidina 593-84-0 facilita a extração de nucleotídeos e peptídeos de vísceras de animais

Tiocianato de guanidina | 593-84-0 | é um forte desnaturante de proteínas. É um pó cristalino branco, irritante e sensível à luz. É solúvel em etanol e água, com ponto de fusão de 118℃. O tiocianato de guanidina é usado principalmente para desnaturação, lise de células e extração de RNA e DNA. É um componente químico comum para extração de ácido nucléico.

A patente cn111500664a divulga um método para extrair nucleotídeos e polipeptídeos de vísceras de animais usando tiocianato de guanidina. Os nucleotídeos são compostos compostos de base purina ou base pirimidínica, ribose ou desoxirribose e ácido fosfórico, amplamente utilizados na medicina, produtos materno-infantis, condimentos e aditivos alimentares. O polipéptido é a - Os compostos formados por aminoácidos ligados entre si por ligações peptídicas são produtos intermediários da hidrólise de proteínas, envolvendo vários campos das hormonas humanas, nervos, crescimento celular e reprodução. Sua importância reside na regulação das funções fisiológicas de vários sistemas e células no corpo, ativando enzimas relevantes no corpo, promovendo a permeabilidade da membrana metabólica intermediária, ou controlando a transcrição do DNA ou afetando a síntese de proteínas específicas. Eventualmente produzirá efeitos fisiológicos específicos.

As vísceras dos animais são ricas em nucleotídeos e peptídeos, mas, atualmente, a extração de nucleotídeos e peptídeos é realizada em sua maioria separadamente, resultando em desperdício de recursos e processos complexos. O tiocianato de guanidina é útil para extrair nucleotídeos e peptídeos de vísceras de animais. Os métodos específicos são os seguintes:

Primeiro, lave as vísceras dos animais frescos, escorra-os, corte-os e amasse-os, adicione água desionizada para obter a solução misturada, a seguir adicione a solução de tiocianato de guanidina à solução misturada, vibre e misture bem e depois deixe em repouso. Em seguida, um carreador contendo sílica é adicionado a ela, porque o tiocianato de guanidina irá clivar as células, e os nucleotídeos liberados das células serão combinados com o carreador de sílica. Retirar o portador contendo sílica, absorver e separar com eluente para obter nucleotídeos purificados.

Em seguida, a solução de NaCl é adicionada à solução residual da qual o transportador de sílica foi retirado, a solução mista é extraída, a protease composta é adicionada, a hidrólise enzimática de micro-ondas é realizada, a solução de hidrólise enzimática é aquecida em banho-maria , centrifugado, o sobrenadante é retirado e o polipeptídeo é obtido após liofilização.

Este método aproveita as características de que o tiocianato de guanidina pode destruir a estrutura celular e desnaturar a proteína. Ele não só pode extrair nucleotídeos e peptídeos sucessivamente, mas também tem as vantagens de um método simples e de alta eficiência. Ao mesmo tempo, também evita o problema de reação entre reagentes bioquímicos ao adicionar reagentes bioquímicos para extração.